Western Blot檢測（蛋白印跡雜交）

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。經(jīng)過聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)分離的蛋白質樣品，通過轉膜方式轉移到固相載體(如PVDF、NC膜)上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶標記(通常是HRP)的第二抗體起反應，經(jīng)過底物化學發(fā)光試劑(如ECL)發(fā)光以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。

ELISA( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )，酶聯(lián)免疫吸附測定

ELISA 是一種結合抗原、抗體特異性反應和酶對底物高效催化作用的高敏感性免疫學實驗技術。ELISA 的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應，洗滌使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開，再加入酶標記的抗原或抗體，通過反應使其結合在固相載體上。此時固相上的酶含量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。